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相衬显微镜的原理及应用

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  相衬显微镜是荷兰科学家泽尼克(Zernike)于1935年发明的,在光学显微镜的发展过程中,相衬显微镜的发明成功,是近代显微镜技术中的重要成就。我们知道,人眼只能区分光波的波长(颜色)和振幅(亮度),对于无色通明的生物标本,当光线通过时,波长和振幅变化不大,在明场观察时很难观察到标本。

  相衬显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检,也就是有效地利用光的干涉现像,将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差,即使是无色透明的物质也可成为清晰可见。这大大便利了活体细胞的观察,因此相衬镜检法广泛应用于倒置生物显微镜。 

                                 

              相衬显微镜:http://www.pelttech.com/xiangchen_24_0.shtml
1. 相衬镜检法在装置上与明场不同,有一些特殊要求:  
  (1)环状光阑(Ring slit):装在聚光镜的下方,而与聚光镜组合为一体——相衬聚光镜。它是由大小不同的环形光阑装在一圆盘内,外面标有10X、20X、40X、100X等字样,与相对应倍数的物镜配合使用。

  (2)相板(Phase plate):装在物镜的后焦平面处,它分为两部分,一是通过直射光的部分,为半 透明的环状,叫共轭面;另一是通过衍射光的部分,叫“补偿面”。有相板的物镜称“相衬物镜”,外壳上常有“Ph”字样。

2. 相衬镜检法是一种比较复杂的镜检方法,想要得到好的观察效果,显微镜的调试非常重要。除此之外还应注意以下几个方面。

  (1)使用滤色片,使光波近于单色; 
  (2)光源要强,全部开启孔径光阑;